一般实验室对HIV合并隐球菌性脑膜炎(以下简称隐脑)的检查是非特异性的。晚期免疫抑制的患者可能出现白细胞减少、贫血、低白蛋白血症和球蛋白抗体增加等症状。而隐脑也可能由于亚急性发作症状和非特异性表达而导致诊断相对困难。因此,对于有发热、头痛等中枢神经系统(CNS)症状或任何免疫功能低下的患者应考虑该病。早期诊断和治疗可能有助于降低隐脑相关病死率。检测血清隐球菌抗原(cryptococcalantigen,CrAg)是病程早期诊断隐球菌感染的一种方法,在神经系统症状出现前至少3周就能检测到该抗原。
研究发现,隐球菌抗原血症的患病率随地理区域不同而变化。例如,在美国,CD4<100cells/l的患者中隐球菌抗原血症的患病率约为3%,而在乌干达,这类患者中的患病率则为13.5%。
因此,患者的初步评估应包括详细病史询问、神经系统检查和血清隐球菌抗原检测。检查还应包括腰椎穿刺、检测颅内压(ICP)和脑脊液(CSF),以确认具有症状和/或阳性血清CrAg的诊断。
腰椎穿刺
通过腰椎穿刺获取CSF,进行验证性测试以诊断隐脑。大约25%~30%的隐脑患者具有正常的CSF谱。另外,腰椎穿刺还可以确定患者的ICP,其与发病率和死亡率密切相关。
印度墨汁染色
印度墨汁染色的优点是可以快速确认隐球菌感染,同时进行验证性测试(如CSF培养或抗原滴度测量)。不管墨汁染色的结果如何,还应进行CrAg测试以确认诊断。抗原滴度测定还可以提供真菌数目并对预后进行评估。
隐球菌培养
隐球菌培养被认为是隐球菌脑膜炎的金标准,但真菌培养需要实验室设施和训练有素的实验室技术人员,而且需要10天以上才能进行可靠的定量计数。尽管用较多量的CSF可以提高培养阳性率,但当真菌负荷低时,培养还可能产生假阴性结果。如用100l未稀释脑脊液与10l按照1:10稀释的CSF相比,灵敏度从82.4%提高至94.2%。
CSF或血清CrAg检测
CSF或血清CrAg检测是隐球菌诊断的基本手段。所有HIV感染者怀疑隐球菌感染或任何有CNS症状的都应该检测CSF中的CrAg。CrAg在CSF中非常敏感并具有特异性,灵敏度范围为93%~100%,特异性为93%~98%。侧流测定(LFA)在疑似脑膜炎患者中具有>99%的敏感性和特异性。与乳胶凝集、培养和墨汁染色相比,LFA具有最佳的测试性能。在疑似隐脑的艾滋病患者中,血清抗原检测的敏感性与CSF检测相当,是不能进行腰椎穿刺患者的常用诊断方式。血清CrAg的筛选有助于确定流行地区的晚期免疫抑制患者的早期疾病。
神经影像学检查
在腰椎穿刺之前,怀疑有颅内压升高和/或CNS损伤的患者必须先进行神经影像学的检查(例如CT或MRI)。隐球菌在中枢神经系统主要累及脑膜及大脑的基底部。CT表现主要为脑膜受累,以大脑底部脑膜及小脑幕强化为主,常伴脑室扩大、脑积水、脑实质低密度灶,有时可见脑脓肿。MRI表现主要是脑实质内的VR间隙扩大形成的胶样假囊、脑积水、脑萎缩及脑膜强化。胶样假囊高度提示本病诊断。部分影像学表现仍缺乏特异性,尤其是在存在免疫缺陷时。
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